1.什么是殘留和污染?

　　殘留(carry-over)是由于前一個樣品中被測物少量駐留于系統(tǒng)中并被引入到下一個進樣的樣品中，或者是由被測物在進樣系統(tǒng)中吸附而造成的現象。

　　殘留主要可以分為三種：

　?、?首先是傳統(tǒng)意義上的殘留主要來自系統(tǒng)中，主要是由于系統(tǒng)中的死體積所產生。

　?、?由于吸附(實驗耗材，管路)導致的殘留。

　?、?在色譜中不完全的洗脫形成的殘留。

　　污染是由于樣品的接收，處理和分析的實驗操作過程中所引入任何能產生檢測干擾的現象。任何形式的殘留都可以視為污染，所以相對于殘留，污染具有更多的隨機性和多源性，這也使得它更難以被診斷和糾正。

　　污染可分為三大類：

　　① 樣品在儲存中和樣本制備前被分析物污染，這與從人/動物取樣轉移到樣品管和保存的過程相關。

　　② 樣品在準備過程中被分析物污染，這表現為樣品從樣品前處理到進LC-MS分析的過程有關。

　　③ 由表現像待測物的未知化合物造成，這主要體現為由基質效應引起的離子化抑制或增強的表現。

　　由于殘留和污染都會影響方法的精密度和準確度，因此必須被仔細監(jiān)測和控制。

　　2.殘留和污染對實驗結果的評估

　　根據FDA的生物分析指導原則，如果殘留空白中分析物峰面積大于LLOQ峰面積的20.0%或觀察到的內標的峰面積不應大于同一分析批中校準樣品、質量控制樣品和其他樣品中觀察到的內標峰面積平均值的5.0%，那么殘留可能會影響到分析的結果，需要進行殘留評估。

　　當樣品的殘留影響百分比(ECI%)小于5%時，可以認為該樣品不受影響，相反則需要對該樣品進行重分析或重進樣。

　　3.殘留和污染的控制和消除

　　殘留可以通過在高濃度的標準或QC樣品之后的空白基質的分析來評估，另外，可以在分析批的起始空位分析數個基質空白樣品來確認儀器系統(tǒng)干凈無污染。

　　一般來說對于有化合物殘留的樣品分析實驗項目可以通過更換產生殘留的試劑，色譜柱等方式來消除，但很多時候不可能消除殘留，所以需要通過合理的安排樣品順序：如參考血藥代謝曲線濃度，將低濃度樣品安排在前，高濃度樣品靠后的方式，或在高濃度樣品后增加空白樣品來減少殘留。

　　污染的存在也可以通過監(jiān)測基質空白，試劑空白和溶劑空白中化合物和內標的存在來判斷，另外，在實際的實驗中，我們也常用進空氣針的方法來判斷污染和殘留是來自進樣板還是來自儀器管路中，通過選擇適當的排除法去尋找原因可以有效的加快排查的速度。

　　若在進樣空氣針中發(fā)現了化合物峰，則可判斷污染來自儀器管路與樣品無關，需要對管路接口，離子源，進樣針，色譜柱等部件進行排查修復。

　　如果起始的基質空白和高濃度樣品后的空白都出現化合物峰，則污染來自于基質或樣品制備中，對實驗前處理中使用的移液器，試劑耗材，人員操作或對更換不同批次的空白基質進行排查。

　　如果化合物峰出現在試劑或者溶劑中，則污染可能來自實驗使用的溶劑，更換同品牌不同批次或不同廠商的實驗試劑排查。